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締一生物生物科普:關于胎牛血清知識問答(一)

更新時間:2017-12-20  |  點擊率:2010

科普:關于胎牛血清知識問答(一)

前面我們說過了如何鑒別胎牛血清的質(zhì)量,但是關于如何保存胎牛血清,也是很多初次接觸細胞培養(yǎng)的實驗人比較關注的問題。今天,小編就為大家分享一下關于胎牛血清的一些常識。

1、 如何儲存和解凍血清才不會使產(chǎn)品質(zhì)量受損?

答:血清推薦融化方法(三步法)

 

 

溫度

100ml

500ml

1000ml

*步

室溫

35min

90min

100min

 

或15-20℃水浴

5min

18min

20min

第二步

20℃水浴

15min

25min

30min

第三步

37℃水浴

20min

35min

45min

 

 

但必須注意的是,融解過程中必須規(guī)則地搖晃均勻。長時間儲存在2-8℃時,血清中的各種蛋白和脂蛋白(如冷凝集素、纖維蛋白原、玻粘連蛋白等)可能聚集而形成沉淀或可見的混濁。因此,推薦在-20℃以下儲存血清,并避免反復凍融。若一次無法用完一瓶,建議無菌分裝血清至恰當?shù)臏缇萜鲀?nèi),再放回冷凍。

2、血清中包含絮狀沉淀是什么,怎么處理?

答:沉淀包含纖維蛋白和脂蛋白。這是正常特性,不會影響產(chǎn)品性質(zhì)。要除去沉淀,離心血清(400g,1-2分鐘)或者簡單的讓其沉淀在瓶子底部,將血清小心的轉(zhuǎn)移到另一個無菌瓶里(一般不建議采用過濾的方法除去沉淀,因為沉淀會堵塞濾膜而無法過濾)。大多情況輕輕搖動沉淀并加熱至37℃就會再溶解。所以,使用產(chǎn)品時要搖動并加熱血清至37℃,沉淀會自然消失。

如何避免血清中產(chǎn)生沉淀?

答: 按如下操作可避免沉淀的產(chǎn)生:

(1)解凍血清/分裝凍存時,須規(guī)則搖晃均勻,使溫度及成分均一,減少沉淀的發(fā)生。

2)勿將血清置于37℃太久,否則血清會變得渾濁,同時血清中許多較不穩(wěn)定的成份也會因此受到破壞,從而影響血清的品質(zhì)。

3)血清的熱滅活非常容易造成沉淀物的增多,若非必要,可以無須做此步驟。

4、 培養(yǎng)基中添加了血清和抗生素后,可長期保存嗎?

答:一旦您在新鮮培養(yǎng)基中添加了血清和抗生素時,您應該在兩到三周內(nèi)使用它。因為一些抗生素和血清中的基本成分在解凍后就開始降解。

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