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盤(pán)點(diǎn)細(xì)胞培養(yǎng)中,內(nèi)毒素的影響

更新時(shí)間:2023-04-19  |  點(diǎn)擊率:708

內(nèi)毒素是革蘭氏陰性細(xì)菌的細(xì)胞壁成分,通常在用于細(xì)胞培養(yǎng)的胎牛血清(FBS)中發(fā)現(xiàn)。FBS中內(nèi)毒素的存在會(huì)對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)和活力產(chǎn)生負(fù)面影響,并可能導(dǎo)致不準(zhǔn)確的實(shí)驗(yàn)結(jié)果。

 

內(nèi)毒素可以激活免疫細(xì)胞,誘導(dǎo)促炎細(xì)胞因子的釋放,從而導(dǎo)致細(xì)胞死亡,抑制細(xì)胞增殖。它們還可以干擾細(xì)胞過(guò)程,如DNA合成和蛋白質(zhì)表達(dá),從而影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。

 

有下列情況者,對(duì)血清內(nèi)毒素應(yīng)格外留意篩選:

 

1.養(yǎng)干細(xì)胞時(shí),干細(xì)胞對(duì)內(nèi)毒素非常敏感,如果血清中內(nèi)毒素≥3EU/ml時(shí),干細(xì)胞很容易死亡。很多使用者,在血清在試用前,就通過(guò)提早審核該批次《檢測(cè)報(bào)告》,以決定是否入圍進(jìn)行試用。

 

2.養(yǎng)免疫細(xì)胞時(shí),過(guò)高的內(nèi)毒素可誘導(dǎo)免疫細(xì)胞釋放炎癥因子,抑制小鼠紅細(xì)胞集落的形成等。

 

3.基因敲除相關(guān)的細(xì)胞實(shí)驗(yàn),培養(yǎng)的細(xì)胞要盡可能保持其原始狀態(tài),任何引導(dǎo)細(xì)胞衰老或凋亡的試劑,都會(huì)讓后續(xù)的實(shí)驗(yàn)結(jié)果失之毫厘,謬以千里"。在準(zhǔn)備血清和其他試劑時(shí),選擇極低的內(nèi)毒素(jinliang ≤1EU/ml),對(duì)實(shí)驗(yàn)至關(guān)重要;

 

4.原代培養(yǎng)、雜交瘤融合、細(xì)胞轉(zhuǎn)染,或者肝細(xì)胞、神經(jīng)細(xì)胞、內(nèi)皮等難養(yǎng)細(xì)胞的擴(kuò)增,這些都需要挑選好的血清給細(xì)胞以有力支持。因此,挑選更低的內(nèi)毒素,是保證實(shí)驗(yàn)順利的**步。

 

5.實(shí)驗(yàn)室有些細(xì)胞,需要長(zhǎng)期培養(yǎng)、長(zhǎng)期凍存,或者經(jīng)常復(fù)蘇、經(jīng)常培養(yǎng)的,血清會(huì)經(jīng)?;蜷L(zhǎng)時(shí)間作用于細(xì)胞。為保證細(xì)胞的健康,都應(yīng)該選用更低內(nèi)毒素的血清,以避免內(nèi)毒素長(zhǎng)久對(duì)細(xì)胞的毒性影響。

 

為了盡量減少內(nèi)毒素對(duì)細(xì)胞培養(yǎng)的影響,建議使用經(jīng)過(guò)測(cè)試和認(rèn)證的內(nèi)毒素水平較低的FBS。重要的是要注意,從胎牛血清中去除所有內(nèi)毒素并不太現(xiàn)實(shí),但過(guò)高的內(nèi)毒素殘留水平,仍可能對(duì)細(xì)胞培養(yǎng)產(chǎn)生影響。因此,仔細(xì)監(jiān)測(cè)胎牛血清對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)和活力的影響,并選擇一款內(nèi)毒素含量低的血清是很重要的。

 

締一生物的Ausbian進(jìn)口胎牛血清,內(nèi)毒素含量低,≤3EU/ml,為細(xì)胞實(shí)驗(yàn)保駕護(hù)航。


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